عربي

Sputnik V , J&J , Oxford/Astrazeneca لقاحات

مستوى المادة: متوسط ​​إلى متقدم

 مستوى وضوح الرسم: متوسط

مدة القراءة : من أربع إلى 6 دقائق

كيف تم صنعها

لطالما كانت الفيروسات الغدية ناقلًا ممتازًا لتوصيل جينات العلاج الجيني ومستضدات اللقاح لعقود (وهذا ما ندعوه منصة لقاح فيروسية معتمدة على الناقلات


• ما هي الفيروسات الغدية؟
• لماذا اخترناها لتطوير اللقاح؟
• كيف تم تصميم الجيل الأول من لقاحات الفيروسات الغدية؟
• يمكن أن يكون ظهور نسخ متماثلة للفيروس الغدي (RCA) مشكلة تتعلق بالسلامة في التصنيع المعتمد فما


تهدف هذه المقالة إلى توجيه القراء ، خطوة بخطوة ، إلى فهم أفضل لهذه التقنية

ما هي الفيروسات الغدية Adenovirus؟
تأتي كلمة “adeno” من الكلمة اليونانية “adēn” ، وتعني “الغدة”. في عام 1953 ، تم عزل الفيروس الغدي من الزوائد الأنفية لطفل وتمت الإشارة إليه على أنه “عامل تنكس غدي”، واختصاره إلى “AD agent” ( Rowe WP et al . )

عدوى الفيروس الغدي
تسبب الفيروسات الغدية حوالي 5-10٪ من أمراض الجهاز التنفسي. عادة ما تسبب التهابات الجهاز التنفسي بدون أعراض ولكنها يمكن أن تكون خطيرة ومميتة للأفراد الذين يعانون من نقص المناعة. العدوى الفيروسية الغدية ليست فقط في الجهاز التنفسي ولكن أيضًا في العين أو الجهاز الهضمي ويمكن أن تؤثر على مجموعة واسعة من العوائل (البشر والحيوانات).
• فترة الحضانة 3-10 أيام .
• عمليات إعادة التنشيط المحتملة في الأطفال والبالغين الذين يعانون من كبت المناعة.

التهاب البلعوم الحموي الحاد (الأطفال من سن 3 سنوات) ، حمى الملتحمة البلعومية (7-8 سنوات)
أعراض شبيهة بالإنفلونزا مثل: احتقان الأنف ، والسعال ، وضيق التنفس ، والشعور بالضيق ، والحمى ، والقشعريرة ، وآلام العضلات والصداع

أمراض الجهاز التنفسي الحادة (ARD) : الحمى ، والسعال ، والتهاب البلعوم ، والتهاب الغدة العنقية ، والأنماط المصلية 4 ، 7 • الالتهاب الرئوي الفيروسي ، التهاب الحنجرة والخناق والتهاب القصيبات.

المتلازمات السريرية في الحالات المثبطة للمناعة:
التهاب رئوي
التهاب الكبد / التهاب البنكرياس الخاطف
التهاب القولون / التهاب المعدة والأمعاء الخاطف
التهاب المثانة النزفي
التهاب الدماغ (نادر) http://www.labanalisibruno.it/files/adenovirus.pdf

التركيب
تحتوي جزيئات الفيروس الغدي على:
• قفيصة عشرينية الوجوه
• القطر 70-90 نانومتر
جسيمات الفيروس الغدي ليس لها غلاف دهني.

العائلة
Adenoviridae أكثر من 50 نمطًا مصليًا

الجينوم عبارة عن حمض نووي DNA خطي مزدوج الشريطة يتكون من 26-45 الف زوج قاعدي:
• تكرار طرفي مقلوب (ITR) (شكل ورود في صورة الجينوم ، أدناه)
• خمسة جينات متقدمة (E1A ، E1B ، E2 ، E3 ، E4) التي تعدل التعبير الجيني للمضيف المطلوب لتخليق البروتين الغدي وتضاعفه.
• خمسة جينات متأخرة (L1-5) مطلوبة لتجميع وتحرير وتحلل الخلايا المضيفة.

لماذا اخترناها لتطوير اللقاح؟ إيجابيات وسلبيات

  • الإيجابيات
  • لا تغزو نسيج واحد فقط ولكن عدة أنسجة
  • سهولة التلاعب الجيني
  • الخصائص المساعدة المتأصلة
  • القدرة على تحفيز الخلايا التائية القوية الخاصة بالجينات المعدلة واستجابات الأجسام المضادة
  • سهولة الإنتاج على نطاق واسع.
  • سلبيات
  • مناعة موجودة مسبقًا في البشر
  • – استجابات التهابية
  • عزل ناقلات في الكبد والطحال
  • ظهور نسخ متماثلة للفيروس الغدي (RCA) أو RCA الزائف
  • العديد من خطوات الإنتاج تزيد من احتمالية التلوث

عملية بناء ناقلات الفيروس الغدي AD agent
قبل التوليد

كما ذكر أعلاه: إن المناعة البشرية الموجودة مسبقًا ، والاستجابات الالتهابية ، وعزل الناقلات في الكبد والطحال قد حدت من استخدام الفيروسات الغدية كناقلات. ومع ذلك ، فإن اختيار الفيروسات الغدية الأقل انتشارًا والأقل عدوى في سكان العالم يمكن أن يحل هذه المشكلة. يستخدم Sputnik V الناقلين Ad26 و Ad5، ويستخدم J&J الناقل Ad26، ويستخدم Oxford / Astrazenca الناقل الفيروسي الشمبانزي (ChAdOx1).
تم تصميم فيروسات Adenovirus لجعلها آمنة وفعالة للاستخدام البشري كلقاحات وناقلات للعلاج الجيني.
إذا قمنا بتطعيم البشر بلقاحات تحتوي على ناقلات فيروسية غدية لا تزال قادرة على التضاعف (RCA) ، فقد يصبح هذا مصدر قلق للسلامة. خاصة في الأشخاص الذين يعانون من نقص المناعة والذين من المحتمل أن ينتهي بهم الأمر مع عدوى غدية مهددة للحياة ومميتة.

يقوم الجين الأول أولاً بنسخ بروتين E1A ، وهو بروتين ضروري لتكاثر الفيروس. ينشط بروتين E1A نسخ الجينات الفيروسية الأخرى المسؤولة عن تخليق الحمض النووي الفيروسي.

بمعنى آخر: لا يمكن إجراء النسخ الفيروسية الغدية بدون وجود الجين E1وأن يكون يعمل بكفاءة

لهذا السبب ، في الجيل الأول من النواقل الفيروسية الغدية ، تم تحضيرها عن طريق القضاء على جين E1 ( يظهر في الشكل أدناه باللون الأخضر) لسببين:
• لجعلها نسخة معيبة
• لإفساح المجال لتسلسل الجينات المعدلة (مثل Spike S من الفيروس SARS-CoV-2 ، باللون الأحمر).
يعمل هذا النموذج كوصلة انتقالية ليسمح بتكرار ناقل الفيروس الغدي.

ماذا تعني التكملة الانتقالية؟
تم تصميم Ad المحذ,ف منه جين E1 داخل كروموسوم خلية (مثل خلايا HEK293 ، 911 ، وغيرها) ، وبالتالي يستمر في مساعدة الفيروس على التضاعف دون أن يكون داخل هذا الناقل الجينوم الفيروسي الخاص به (مثل

BLUETOOTH-PAIR)

لسوء الحظ ، لا يستمر دائمًا بالعمل كـ BLUETOOTH-PAIR نظرًا لوجود احتمالات إعادة التركيب المتماثل التلقائي

بين ناقل الفيروس الغدي ومناطق E1 أثناء التضخيم داخل خلايا HEK293 (المنطقة الرمادية) ، مما قد يسمح بظهور ناقلات الفيروس الغدي (RCA) المختصة للنسخ!

ومع ذلك ، دفع التقدم العلمي الباحثين إلى إيجاد خدعة لطيفة. لقد استبدلوا الجزء المتماثل بتسلسلات أخرى PGK و HBV polyA (خلايا PER.C6 كمثال). الآن ، RCA نادر الحدوث جدًا.

Leave a Reply